在緩沖液中Tris-HCl與HEPES都是應(yīng)用比較普遍的。為什么把它們兩個(gè)拿出來(lái)對(duì)比，這也是為了很好的讓大家了解到更多相關(guān)信息，以便在采購(gòu)和使用過(guò)程中更準(zhǔn)確。

1、Tris-HCl緩沖液

Tris緩沖液是在生物化學(xué)研究中使用較廣泛的一種緩沖劑，其本身為弱堿，常用有效pH在“中性”范圍，Tris-HCl緩沖液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸鹽緩沖液：pH＝5.0～9.0。

1）Tris-HCl緩沖液優(yōu)點(diǎn)

堿性較強(qiáng)，可以只用這一種緩沖液配置由酸到堿的范圍pH緩沖液；對(duì)生物化學(xué)過(guò)程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。

2）Tris-HCl緩沖液缺點(diǎn)

pH受濃度影響較大，稀釋10倍，pH變化大于0.1

溫度效應(yīng)大，如4℃時(shí)pH=8.4，37℃時(shí)pH=7.4

2、HEPES緩沖液

HEPES是一種非離子兩性緩沖液，其在pH7.2~7.4范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，常用在生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。

1）HEPES緩沖液優(yōu)點(diǎn)：

在開(kāi)放式培養(yǎng)或Cells觀(guān)察時(shí)能維持較恒定的pH值，并對(duì)Cells傷害性作用。

2）HEPES緩沖液缺點(diǎn)：

在高濃度時(shí)對(duì)一些Cells可能有毒，與其他緩沖劑相比價(jià)格略貴。

Tris-HCl緩沖液與HEPES緩沖液的應(yīng)用

1、Tris-HCl緩沖液

Tris是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一，其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體系，穩(wěn)定電泳過(guò)程中的PH。此外，Tris還是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物。Tris也被用作滴定標(biāo)準(zhǔn)物。作為蛋白緩沖液時(shí)，若后續(xù)工作需要質(zhì)譜，則不適宜用Tris，換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。

2、HEPES緩沖液

HEPES緩沖液對(duì)Cells傷害性作用，它是一種氫離子緩沖劑，能較長(zhǎng)時(shí)間控制恒定的pH范圍。使用時(shí)濃度為10-50mmol/L，一般培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/LHEPES即可達(dá)到緩沖能力。它還用于環(huán)境，分析和生物學(xué)研究；作為陽(yáng)離子交換層析中的結(jié)合緩沖液和洗脫液；作為凝膠電泳中的運(yùn)行緩沖液等。