樣品制備
我們可以接受的樣品形式為
1、PVDF膜結(jié)合的樣品(請(qǐng)?zhí)峁┱ぃ?/span>
2、HPLC純化后的凍干粉樣品。
以下建議會(huì)有助于您準(zhǔn)備您的蛋白測(cè)序的樣品,這些意見適用于幾乎所有的純化方法。
1、樣品不能含有下列會(huì)干擾蛋白測(cè)序的物質(zhì):
去污劑(Detergents)/ 鹽分(Salts)/ 非揮發(fā)性緩沖液(Non volatile buffers)
胺(Amines)/ 氨基酸(Amino acids)
2、避免因吸附而導(dǎo)致的樣品丟失:
當(dāng)分離純化小量的蛋白時(shí),樣品的回收率往往較低,很大的一個(gè)原因是由于表面吸附,下面一些小竅門有助于解決這個(gè)問題:避免透析 / 不要讓樣品干透,用盡可能小的管 / 特殊的疏水性蛋白,最多可加SDS 至0.05 %以減少吸附損失。
3、在SDS-PAGE 電泳純化蛋白時(shí),注意下面一些事項(xiàng)能更好的保證樣品制備的成功率:
1) 每三至四周配置一次丙烯酰胺儲(chǔ)液,用所能得到的最好的試劑和水;
2) 用盡可能薄的膠來(lái)分離,最好聚合過夜使膠聚合充分,上樣之前預(yù)電泳數(shù)分鐘;
3) 充分上樣,使每條帶能有1-5 ug的目的蛋白
樣品信息
送達(dá)我們的樣品請(qǐng)注明以下信息:
1、 量。 我們要求提供至少20pmol, 希望提供50-100pmol,以便我們有足夠的量重復(fù)實(shí)驗(yàn)。但經(jīng)驗(yàn)告訴我們,客戶提供給我們的樣品經(jīng)常是被高估了樣品的量,我們推薦將已定量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白做一系列稀釋,同樣品一起分道電泳,這樣有助于準(zhǔn)確估計(jì)樣品的數(shù)量級(jí)。
2、 純度。 無(wú)論液相樣品或轉(zhuǎn)膜樣品,最少得達(dá)到75%的純度(基于摩爾數(shù)),重要的一點(diǎn),所有的樣品不能含有任何非揮發(fā)性的緩沖液、避免氨基酸污染(Tris- glycine緩沖體系不合適),絕對(duì)不能含有鹽分或去污劑。推薦您拿給我們的樣品的最后一步用反向HPLC制備。
3、 其他信息。期望測(cè)得的氨基酸個(gè)數(shù) / 分子量 / 組織來(lái)源 / 制備方法等
價(jià)格
開機(jī)費(fèi):¥1600元,含前五個(gè)氨基酸測(cè)序的費(fèi)用;此部分款項(xiàng)需預(yù)付,無(wú)結(jié)果不再退還。 每循環(huán):¥248元