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公司新聞
什么是免疫熒光三標(biāo)?
2011-05-26IP屬地 火星235

   做免疫熒光實(shí)驗(yàn)中,經(jīng)常要進(jìn)行免疫熒光的雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn),也就是在同一個(gè)樣本上同時(shí)進(jìn)行兩種蛋白的免疫熒光檢測(cè)。具體的實(shí)驗(yàn)時(shí),可以選擇不同來(lái)源的一抗,然后再選擇分別針對(duì)一抗的二抗,同時(shí)二抗上標(biāo)記有不同的熒光團(tuán)。一般的雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)里,都會(huì)選擇一個(gè)綠色的(如FITC、Cy2、Dylight 488等)熒光標(biāo)記,一個(gè)紅色的(如Rhodamin、Cy3、TRITC、Texas Rad、Dylight 539等)的熒光標(biāo)記。紅綠二色的區(qū)分度很大,效果也比較理想。那么,如果是三標(biāo)呢?請(qǐng)看看下面的一個(gè)圖。
免疫熒光三標(biāo)?——藍(lán)色熒光的AMCA與Dylight 405標(biāo)記二抗
      左側(cè)的一個(gè)免疫熒光圖片就包括了3種顏色,綠色FITC(FITC最大吸收光波長(zhǎng)為490495nm,最大發(fā)射光波長(zhǎng)520530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光)和紅色羅丹明Rhodamin(最大吸收光波長(zhǎng)為570nm,最大發(fā)射光波長(zhǎng)為595~600nm,呈橘紅色熒光)的熒光均為熒光團(tuán)標(biāo)記的二抗,而第三種顏色則來(lái)自于負(fù)染細(xì)胞核的藍(lán)色DAPI染料(DAPI 的激發(fā)光波長(zhǎng)為358 nm ,發(fā)射光波長(zhǎng)為461 nm ,熒光激發(fā)下發(fā)藍(lán)光,與細(xì)胞核DNA結(jié)合)。一般來(lái)說(shuō),綠色和紅色熒光重合后顯示的是黃色,而橙色、黃色、紅色的光非常接近,因此三標(biāo)的時(shí)候,一般選擇藍(lán)色熒光。就如左圖所示。
dylight405-amca.jpg
      實(shí)際上,上面的示例并不是完全意義上的免疫熒光三標(biāo),因?yàn)镈API只相當(dāng)于負(fù)染。還有一種情況,需要同時(shí)在一個(gè)樣本里通過(guò)免疫熒光技術(shù)對(duì)三種蛋白進(jìn)行定位,這就需要選擇第三種熒光團(tuán),而不是DAPI這樣的染料。也即,一個(gè)綠色熒光標(biāo)記的二抗、一個(gè)紅色熒光標(biāo)記的二抗,再加一個(gè)藍(lán)色熒光標(biāo)記的二抗。艾美捷為您提供兩種藍(lán)色熒光標(biāo)記的抗體產(chǎn)品,一種是AMCA藍(lán)色熒光,還有一種是具有更高熒光強(qiáng)度、更好光學(xué)穩(wěn)定性和敏感度的Dylight 405藍(lán)色熒光。
    右圖所示即為AMCA藍(lán)色熒光與FITC、Cy3等熒光的對(duì)比圖例。AMCA藍(lán)色熒光團(tuán)的吸收光波長(zhǎng)最大為350nm,發(fā)射熒光則為450nm。對(duì)于熒光顯微鏡來(lái)說(shuō),AMCA可以用汞燈來(lái)激發(fā),用紫外濾板來(lái)觀察。由于AMCA的信號(hào)相對(duì)較弱,單標(biāo)實(shí)驗(yàn)中不推薦使用AMCA。AMCA和熒光素的熒光波長(zhǎng)只有很小的重疊范圍,而和發(fā)出長(zhǎng)波長(zhǎng)熒光的熒光基團(tuán)沒(méi)有或者只有極少的重疊,因此它最常用于多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,比如免疫熒光顯微鏡和流式細(xì)胞儀。由于人眼不能很好的檢測(cè)藍(lán)色熒光,在多標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)中,AMCA耦聯(lián)的二抗應(yīng)當(dāng)被用于檢測(cè)大量的抗原。艾美捷提供EarthOx 多種藍(lán)色AMCA熒光標(biāo)記的二抗,部分產(chǎn)品如下:

山羊抗大鼠IgG二抗, 藍(lán)色AMCA熒光標(biāo)記 AMCA AffiniPure Goat Anti-Rat IgG(H+L) 產(chǎn)品詳情
兔抗山羊IgG二抗, 藍(lán)色AMCA熒光標(biāo)記 AMCA AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG(H+L) 產(chǎn)品詳情
山羊抗兔IgG二抗, 藍(lán)色AMCA熒光標(biāo)記 AMCA AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) 產(chǎn)品詳情
山羊抗小鼠IgG二抗, 藍(lán)色AMCA熒光標(biāo)記 AMCA AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L) 產(chǎn)品詳情

    同時(shí),Dylight 405作為Dylight系列的熒光團(tuán),具有很多優(yōu)勢(shì),包括更高的熒光強(qiáng)度、更好的光學(xué)穩(wěn)定性和特異性、更高的性價(jià)比等。具體見(jiàn)熒光二抗的選擇——Dylight熒光與傳統(tǒng)熒光標(biāo)記的比較。EarthOx的部分Dylight 405熒光抗體產(chǎn)品如下:

山羊抗大鼠IgG二抗, 藍(lán)色DyLight 405熒光標(biāo)記 Dylight 405 AffiniPure Goat Anti-Rat IgG(H+L) 產(chǎn)品詳情
兔抗山羊IgG二抗, 藍(lán)色DyLight 405熒光標(biāo)記 Dylight 405 AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG(H+L) 產(chǎn)品詳情
山羊抗兔IgG二抗, 藍(lán)色DyLight 405熒光標(biāo)記 Dylight 405 AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) 產(chǎn)品詳情
山羊抗小鼠IgG二抗, 藍(lán)色DyLight 405熒光標(biāo)記 Dylight 405 AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L) 產(chǎn)品詳情

      作為多家國(guó)際知名品牌的中國(guó)或區(qū)域代理,艾美捷能為您提供全系列的Dylight原裝進(jìn)口熒光二抗,包括Jackson、KPL的大包裝粉末形式的 Dylight熒光二抗,另外,也提供EarthOx的小包裝液體形式Dylight熒光二抗,均具有很高的性價(jià)比。針對(duì)熒光標(biāo)記二抗,有FITC、 TRITC、Rhodamine、PE、Cy3/5、AMCA、Dylight等多種熒光標(biāo)記二抗;按照檢測(cè)物種分,有抗 人、大鼠、小鼠、豬、驢、綿羊、山羊、小雞、馬、兔、倉(cāng)鼠、狗、牛,以及多種細(xì)菌類(lèi)二抗;另外,還有IgG、IgA、IgM以及IgG(Fc)、 IgG(ab’)2等不同類(lèi)型抗體。如果您對(duì)上述產(chǎn)品感興趣,請(qǐng)致電027-84454412,或13317111952到艾美捷科技有限公司垂詢相關(guān)的產(chǎn)品信息及完整實(shí)驗(yàn)解決方案。
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